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qiagen 12145質(zhì)粒提取試劑盒Plasmid Midi Kit

轉(zhuǎn)染效率與質(zhì)粒純化方法。

采用不同方法制備pRSVcat DNA，通過(guò)脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染將其導(dǎo)入的細(xì)胞系內(nèi)，40小時(shí)后測(cè)定CAT表達(dá)水平，確定轉(zhuǎn)染效率。每個(gè)柱形代表4個(gè)獨(dú)立的轉(zhuǎn)錄的平均值（2個(gè)質(zhì)粒制備物分別轉(zhuǎn)染2次）。使用QIAGEN Plasmid Kit可獲得zui高的轉(zhuǎn)染效率。

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Performance

QIAGEN Plasmid Kit利用重力流QIAGEN陰離子交換柱技術(shù)高效純化質(zhì)粒DNA。產(chǎn)量可達(dá)10 mg（Giga）、2.5 mg（Mega）、500 µg（Maxi）、或100 µg（Midi）高拷貝質(zhì)粒DNA（培養(yǎng)體積取決于質(zhì)?？截悢?shù)、插入片段大小、宿主菌株和培養(yǎng)基。）QIAGEN Plasmid Kits純化的質(zhì)粒DNA適合多種應(yīng)用，如：轉(zhuǎn)染（參見(jiàn)"Transfection efficiency versus plasmid purification method"）、克隆和體外轉(zhuǎn)錄。

Principle

QIAGEN-tips內(nèi)*的陰離子交換樹脂專為純化核酸設(shè)計(jì)。它*的分離特性，使純化的DNA的純度相當(dāng)于連續(xù)2次CsCl梯度離心得到的DNA純度。預(yù)裝的QIAGEN-tips利用重力流原理工作，縮短了純化質(zhì)粒的手動(dòng)操作時(shí)間。整套QIAGEN質(zhì)粒純化體系避免苯酚、lvfang、溴化乙錠和CsCl等有毒物質(zhì)，減小對(duì)使用者和環(huán)境的危害。

Procedure

使用QIAGEN Plasmid Kits，細(xì)菌裂解物通過(guò)離心澄清。澄清后的裂解物上樣到陰離子交換柱，質(zhì)粒DNA在適當(dāng)?shù)牡望}條件和pH條件下與樹脂進(jìn)行選擇性結(jié)合。RNA、蛋白質(zhì)、代謝產(chǎn)物和和其它低分子量雜質(zhì)用中鹽洗滌液去除，用高鹽緩沖液洗脫純質(zhì)粒DNA（參見(jiàn)"QIAGEN Plasmid Kit procedures"）。得到的DNA用異丙醇沉淀濃縮和脫鹽后，離心收集。

Applications

QIAGEN Plasmid Kits純化質(zhì)粒DNA適合多種應(yīng)用，如：

轉(zhuǎn)染

克隆

PCR

體外轉(zhuǎn)錄

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